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為什么要細(xì)胞計(jì)數(shù)?

  • 發(fā)布日期:2022-12-21      瀏覽次數(shù):925
    •   在細(xì)胞培養(yǎng)工作中,常需要了解細(xì)胞生活狀態(tài)和鑒別細(xì)胞死活,確定細(xì)胞接種濃度和數(shù)量以及了解細(xì)胞存活率和增殖度,如用酶消化制備的細(xì)胞懸液中細(xì)胞活力的鑒別,凍存細(xì)胞復(fù)蘇后的活力檢測等。細(xì)胞懸液制備后,常用活體染料臺(tái)盼藍(lán)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。準(zhǔn)確的細(xì)胞計(jì)數(shù)對(duì)評(píng)估培養(yǎng)的細(xì)胞生長是至關(guān)重要,因?yàn)殄e(cuò)誤的計(jì)數(shù)會(huì)導(dǎo)致關(guān)于細(xì)胞健康的錯(cuò)誤結(jié)論。細(xì)胞計(jì)數(shù)可以使用血球計(jì)數(shù)板、自動(dòng)計(jì)數(shù)器進(jìn)行。細(xì)胞計(jì)數(shù)一般用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板,按白細(xì)胞計(jì)數(shù)方法進(jìn)行計(jì)數(shù),便于確定細(xì)胞的生活狀況。
       
        細(xì)胞生長的每個(gè)階段:
       
        停滯期:細(xì)胞適應(yīng)培養(yǎng)條件的階段,細(xì)胞在此階段不分裂。細(xì)胞通常在起始培養(yǎng)后的24小時(shí)內(nèi)附著,該階段的總時(shí)長取決于培養(yǎng)之初使用細(xì)胞的生長階段和接種密度。
       
        對(duì)數(shù)期:細(xì)胞在此階段積極分裂,是評(píng)估群體生長和通用數(shù)據(jù)收集的時(shí)間。對(duì)數(shù)期的后期,過度擁擠導(dǎo)致細(xì)胞脅迫之前是傳代細(xì)胞(亞培養(yǎng))的時(shí)機(jī)。
       
        平穩(wěn)期:隨著細(xì)胞達(dá)到100%融合,細(xì)胞在此階段生長放緩,不足1/10的細(xì)胞處于活躍細(xì)胞周期。細(xì)胞在此階段容易受傷,因此需要小心觀察以確保細(xì)胞在此階段之前或之初進(jìn)行傳代。
       
        衰退期:細(xì)胞周期的自然組成部分。在此階段,隨著細(xì)胞死亡占據(jù)主導(dǎo)地位,活細(xì)胞群體數(shù)量減少。
       
        細(xì)胞計(jì)數(shù)原理:細(xì)胞懸液制備后,需要計(jì)算懸液中所含細(xì)胞數(shù)量;一般以細(xì)胞數(shù)/毫升表示。因只有健康的細(xì)胞才有活力,接種后能夠生長增殖,所以在接種應(yīng)先檢查一下細(xì)胞的活力。